怎么验精子的质量-羊的繁殖新技术

精液品质检查的目的是为了鉴定其品质的优劣，以便确定其利用价值。同时，它也反映种公牛的饲养管理水平和生殖功能的状态，是检验精液稀释、保存和运输效果的唯一手段，还能反映采精技术操作水平的高低。精液品质检查主要有以下几项。

1.精液的外观检查

（1）射精量

射精量是指公畜1次采精所射出的精液容积，可用带有刻度的集精瓶直接测出，公牛的射精量一般为3～10mL。绵羊、山羊的射精量见表2.2.1。当公羊的射精量太多或太少时，都必须查明原因。射精量太多，可能是由于副性腺分泌太多或其他异物（尿、假阴道漏水）混入所至；过少，可能是由于采精技术不当、采精过频、生殖器官功能衰退所致。凡是混入尿、水及其他不良异物的精液，均不能使用。

（2）色泽与气味

羊正常精液呈乳白色或浅乳黄色，其颜色因精子浓度高低而异，乳白色程度越重，表示精子浓度越高。若精液颜色异常，表明公羊生殖器官有疾病。精液一般无味，有的精液带有动物本身的固有气味，如羊精液略有膻味。精液若有异味，如尿味、腐败臭味时应弃去禁用。

（3）云雾状

羊正常精液因精子密度大而呈浑浊不透明状，肉眼观察时，由于精子运动而呈云雾状。精液浑浊度越大，云雾状越显著。乳白色云雾状越浓，表明精子密度和精子活力越高。

2.显微镜检查

（1）精子活率检查

精子的活率也称活力，是指精液中呈直线运动的精子所占的百分率。精子的活率可直接反映精子自身的代谢功能，与精子授精能力密切相关，是评定精液品质的一个重要指标。一般在采精后，精液处理前、后和输精前均要进行精子活率的评定。精子活率评定方法是，在37～38℃的环境下，用200～400倍的生物显微镜进行观察。多采用“十级评分制”，即按精子直线运动占视野中精子的估测百分比评为10个等级，100%直线运动者为1.0，90%者为0.9，以此类推。

（2）密度检查

精子密度是指单位容积（mL）精液内所含有的精子数目。目前，测定精子密度的方法主要有估测法、血细胞计数法和光电比色法。估测法是生产中常用的方法，常结合精子活力检查进行。根据显微镜下精子的密集程度，把精子的密度大致分为密（精子之间的距离小于1个精子的长度）、中（精子之间的距离大约等于1个精子的长度）、稀（精子之间的距离大于1个精子的长度）3个等级，这种方法能大致估计精子的密度，主观性强，误差较大。血细胞计数法是公畜精液做定期检查的一个方法，可以准确地测定每单位容积精液中的精子数，一般采用血细胞计数板进行。光电比色法是目前国际上普遍采用的测定羊精子密度的方法，其原理是利用精液的透光性，精子密度越大其透光性越差；此方法快速、准确、操作简便。

（3）形态检查

图2.2.2　畸形精子示意图

①精子畸形率　一般情况下，羊的精液都有一定比例的畸形精子，正常精液的精子畸形率一般不超过20%。精子畸形的检查方法：取1小滴被测精液置于载玻片上，将样品滴以拉出形式制成抹片，切忌将精液推出而造成人为精子损伤。自然干燥5min，每样品制作2个抹片。在风干的抹片上滴上1.0～2.0mL中性福尔马林固定液，固定15min后用清水缓缓冲去固定液，吹干或自然风干。然后将固定好的抹片反扣在带有平槽的有机玻璃面上，把姬姆萨氏染液滴于槽和抹片之间，让其充满平槽并使抹片接触染液，染色1.5h后用清水缓缓冲去染液，晾干待检。将制备好的抹片在显微镜（400～600倍）下观察，每个抹片观察200个以上精子（分左、右2个区），取2个抹片的平均值，变异系数不得大于20%，若超过应重新制片。计算出畸形精子百分率。畸形精子形态如图2.2.2所示。

②精子顶体异常率　顶体异常有膨大、缺陷、部分脱落、全部脱落等数种，若超过一定比例会直接影响其受精率。

③检查方法　采用测定精子畸形率的方法制作抹片，自然干燥，用1～2mL福尔马林磷酸缓冲液固定。对含有卵黄、甘油的精液样品需用含2%甲醛的柠檬酸钠液固定。静置15min，水洗后用姬姆萨氏染液染色90min或用苏木精染液染色15min，水洗、干燥后再用0.5%伊红染液复染2～3min。水洗、干燥后置于1 000倍显微镜下用油镜检查，或用相差显微镜观察。每张抹片需观察300个精子，统计出精子顶体异常率。

3.生物学检查

精液中如果有大量的微生物存在，不仅会影响精子的寿命、降低受精力，而且还会导致疾病的传播。因此，目前国内外都十分注重精液的微生物检查，精液中含有的病原微生物及菌落数是精液品质评定的重要指标，并作为海关进出口精液的重要检查项目。